P2加入后要尽快（五分钟内）加入P3。P2加了两次，P3也得加两次，这样提取结果没有影响。质粒提取时，P1起着悬浮细菌的作用，PH值为中性，而P2起着裂解细菌的作用，为碱性，这一步又称为碱裂解。P3为酸性，中合P3。P2加了一倍，P3也加一倍，同样起到中和的作用。当然，如果你用试剂盒提，最后离心上柱的液体量会多一些，一次加不完可两次加入。