1、反应原理是：碱性环境中，Cu2+可与肽键形成紫色的螯合物，双缩脲试剂是与肽键反应。
2、高温处理的蛋清溶液与双缩脲试剂反应会产生紫色反应，高温处理的蛋清溶液中仍有肽键胃液处理过的蛋白质溶液与双缩脲试剂也可产生紫色反应，胃液中含有蛋白酶，只能将蛋白质水解为短肽，所以胃液处理过的蛋白质溶液也有肽键。